光合细菌的扩培

1.光合细菌生长条件

光合细菌的生长需要有适宜的外部环境和合理的营养条件，才能正常快速繁殖，产出优质菌液。

1.1适宜的外部环境（1）基质：洁净水（一般为无菌水）、海水或加粗食盐的淡水。（2）温度：15-45℃，最适温度 28-36℃。（3）光照：太阳光或4000勒克斯（LX）的光源（相当于60瓦的白炽灯）。（4）pH值：6-10，最适为8-8.5。

1.2合理的营养条件：全面的营养元素与合理的配比是光合细菌繁殖的重要条件。光合细菌能通过细胞壁选择性地吸收碳、氢、氮、磷、钾、钠、钙、镁、硫及某些微量元素。光合细菌通过光合作用、脱氮或发酵、呼吸作用获得能量。

2、光合细菌的发酵培养

2.1工具：有盖可密封的透明塑料桶3个（100升1个，50升2个）、搅拌木棍，使用前将容器、木棍清洗干净，使用浓度为50毫克/升的漂白粉消毒及阳光曝晒干燥备用。水：纯净水或者蒸馏水最好。自来水需在阳光下曝气2-3天后备用，其它如池塘、河流、湖泊或其它天然水，可将水煮开，冷却后使用。

2.2所需原材料：光合细菌菌种20千克、培养基1千克（必须从正规厂家购买合格的光合细菌菌种和培养基，有的厂家的培养基不是1千克，具体看标签）；辅助工具：电子秤、遮阳网、电灯、温度计、pH试纸。

2.3接种量：接种量一般在20%-50%之间，但菌种含量不要低于20%，即培养液∶菌种=4∶1，光合细菌培养基:清水:菌种=1∶80∶20，即1千克培养基+80千克水+20千克菌种，配成100千克的菌液。

3.操作步骤：

现以培养100千克光合细菌为例说明：

3.1将培养基用水稀释化开并搅拌均匀，倒入80千克水中，用木棍搅拌均匀。

3.2将20千克的光合细菌菌种倒入培养液中搅拌均匀，然后将配好的光合细菌分装到塑料桶中，拧上盖子，培养液不要完全装满塑料桶，要留5%的空气给它。实践证明，光合细菌培养在微厌氧环境下是最好的，既做到适度密封，又便于摇动均匀，这样繁殖速度比完全封闭的，要快要好。

3.3密封好的塑料桶放在阳光充足的地方晾晒，晚上在阴暗处可用60瓦的白炽灯补充光照，效果更佳。使用海水扩培需要晾晒7天左右。

3.4晾晒期间每天都要晃动光合细菌。

3.5经过3-5天的培养，光合细菌颜色由淡红色慢慢转变成浓稠的深红色，呈浓稠状，气味越来越浓，有一股特殊的臭味，pH值测量在8.0-9.0之间，则培养成功。

3.6扩培好的光合细菌可留下20升做为下次扩培光合细菌的菌种，培养好的菌液可投入使用。

4.培养光合细菌的注意事项

4.1培养过程注意彻底灭菌

培养过程中要注意减少杂菌的混入，在清洗塑料桶的环节和曝气环节以及加入菌种和培养液的过程中一定要保持较高的洁净度，最好带手套、口罩、穿试验服操作。培养地点选择透光的室内最佳，没有条件的也要注意培养区域内不能有污染物。混入杂菌会导致培养的光合细菌的器皿壁上有灰点、白点或者是壁上发绿等而导致培养失败。

4.2要选择在阳光充足，有连续3天以上的晴天的时候培养光合细菌。

4.3为保证光合细菌的活菌含量及活性，建议光合细菌菌种反复扩培5次后，及时更换新菌种。

4.4夏季扩培时，光照充足，紫外线强烈，室外气温超过36℃，不利于光合细菌快速扩培。为获得更多活菌含量，请务必遮光处理。方法为用黑色塑料遮阳网遮挡阳光，遮阳网不要紧贴发酵容器，否则黑色遮阳网吸热使发酵液温度过高。遮阳网要悬空，遮光时间为上午10点至下午3点。

4.5培养过程中不能随便打开培养容器，否则容易破坏培养容器中密封的厌氧环境而导致培养失败。