一种简便的菌种保藏方法：每五年传代一次的菌种维护管理方案

随着饲料工业的发展，固态发酵技术在活性酵母饲料，益生素，酶制剂等一些饲料产品生产中得到了迅速的推广和发展，菌种退化则是一些企业经常发生的事。这里介绍一种菌种维护与保藏方法，经过多年的实践，证明它是一套行之有效，简单易行的管理方法。

1、 菌种的保藏

1.1 扣囊拟内孢霉，白地霉，皮状丝孢酵母及所有产孢子的真菌
取麦麸少许，按1︰0.8的比例加入自来水，用手搅拌均匀后，塞入10×100mm的试管中，塞到试管的1/3处为止，然后用棉塞塞住试管口，10支一捆用牛皮纸包扎好，于0.1—0.14Mpa的蒸汽压力下灭菌1小时，取出，置于无菌操作室或无菌操作柜中冷却。
然后在无菌条件下接入菌种，移入培养室（箱）中培养，培养成熟后，进入组装，成熟标志是扣囊拟内孢霉，皮状丝孢酵母，白地霉等为全管全长成白色，一般培养30—40小时即可全部长成白色，而产孢子的丝状真菌以全管长满丰厚的本色孢子为度，一般培养时间长达72小时。
菌种保藏的装置图见图一。组装前，18×180mm试管必须灭菌处理，橡皮塞最好也要事先灭菌，可用70%酒精溶液擦拭，烘干。氯化钙要事先在105度烘箱中烘干一小时。

图一

组装完毕后，置于冰箱中于4度温度下保藏，可保藏4---5年不变质不退化。一般置于冰箱后，14天后麦麸曲种全部都会变干，所以该方法集干燥、低温、缺氧三种功能于一体，有效地防止了菌种的退化，使用时也很方便易行。

1.2 其它酵母菌
如假丝酵母，掷孢酵母，铁红酵母，啤酒酵母，产香酵母及其它一些能产生特异物质的酵母（如产虾青素的红发麸酵母）等。具体保藏方法同上所述，只是培养基中补充0.5%的葡萄糖即可。

1.3 细菌，放线菌等
可采用砂土管保藏法，本文略。

2、菌种的维护管理方案
有一个正确而规范的管理菌种的方法是保证产品质量的前提之一，基本原则之一是尽量减少传代次数。采用下面的工艺流程可达到这一目的。见下图二。
一般来讲，五年后保藏种不会退化，只需取一支，转接到加富培养基上培养一次，再做生产用的斜面菌种，同时又可做出发菌种作出下一个五年用的24支组装式保藏种，如此循环往复下去。
所以从流程中可看出，每五年实际才传代转管一或二次，把菌种自然变异退化的几率减少到最低的程度，不失为一套较为规范科学的菌种维护管理方案。

图二

(来源：《粮食与饲料工业》杂志1996年第10期，钟启平)

(备注：本网易号"养鱼第一线"欢迎您的光临！本文系刘文俊原创，仅供参考和交流！内容和图片大多来源于网络资料，如有异见请告知，欢迎指正和留言讨论，更多精彩内容请登录西南渔业网和"养鱼第一线"公众号，如有不同见解或者内容补充请私信或留言或评论分享！)