论文：饲料中添加乳酸菌对南美白对虾虾苗生长的影响

     饲料中添加乳酸菌对南美白对虾虾苗生长的影响

曾思源，饶从稳，2，韩坤煌*，陈欣欣，詹巧玲，李菲艳，李华民

（1.宁德师范学院生命科学学院/闽东水产品精深加工福建省高校工程研究中心，福建 宁德 352100；2.福建农林大学食品科学学院，福建 福州 350000）

南美白对虾（Penaeus vannamei），学名凡纳滨对虾，又名白肢虾、白对虾，为广温、广盐性热带虾类，原产于太平洋西海岸至墨西哥湾沿岸,是世界三大经济虾类之一。南美白对虾也是我国主要的虾类养殖对象，是一种经济效益高的养殖品种，其肉质鲜美，含肉率高，营养丰富，深受消费者的喜爱。

随着南美白对虾养殖规模日渐扩大，病害、食品安全等诸多问题也开始显现。一方面由于养殖过程中过多使用药物，造成虾代谢系统紊乱，抵抗力下降；另一方面是细菌、病毒和寄生虫引起的各种病害增多。近年来，绿色、环保药物、益生菌等在水产养殖中大量应用，效果良好。

乳酸菌是一类能利用可发酵碳水化合物产生乳酸的异氧厌氧型细菌，具有提高养殖对象的摄食量、促进其肠道消化、增强机体抗病力、强化肝脏功能和调节水质等优点，在南美白对虾养殖生产中被广泛应用。目前，在基础饵料中添加乳酸菌对南美白对虾生长影响的研究报道不多，现通过添加不同质量分数的乳酸菌混合饵料，喂养南美白对虾虾苗，分析其对南美白对虾虾苗生长性能的影响，以期为生产实践中合理使用乳酸菌喂养南美白对虾提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间

2021年3月24日—4月23日。

1.2 试验地点

试验地点位于福州市长乐友丰养殖有限公司虾苗场，共有12口高位池，面积均约300 m，高均约2 m，前期只使用4口高位池。投苗前，用火枪喷射火焰灼烧4口高位池地面与墙壁，进行高温消毒。对火焰喷射不到的地方，使用氢氧化钠溶液消毒。投苗前7 d内，选择阴天或雨天，将被火焰灼烧过的4口高位池洗净，每667 m按1 m水深使用漂白粉50 kg，严格消毒，其他8口高位池亦要在分苗前完成相同的消毒程序。

1.3 试验材料

1.3.1 试验虾

试验虾苗购自厦门喜大生物科技有限公司，初始平均体长（0.33±0.06）cm，平均体质量为（0.049±0.014）g，投放密度约为666尾/m。将12口高位池分成4组，分别为A、B、C、D组，A组为对照组，每组3口高位池。虾苗养殖的第20天开始分苗，将虾苗平均分至12口高位池进行养殖，以保障成活率以及平行样品数据的准确性。用分别添加质量分数为0%，0.75%，1.00%和1.25%乳酸菌的混合饲料进行饲养。

1.3.2 试剂和设备

生理盐水，亚硝酸盐氮，氨氮试剂盒；溶氧仪，pH计，电子天平，高精度数显电子盐度计，显微镜，载玻片，盖玻片，试管，100 mL烧杯，100 mL容量瓶等。

1.4 试验方法

1.4.1 乳酸菌用法

乳酸菌来自厦门优必和生物科技有限公司，按质量分数1.00%的量，以接种扩培的方式接入菌种，依次加入3%的糖蜜和96%的水充分搅拌直至完全融解，密闭发酵3 d左右，直至产生芳香气味。使用pH试纸测得pH值为3~4即可，然后分别按照质量分数0%，0.75%，1.00%和1.25%的比例与对虾饲料混合，待用。

1.4.2 水质指标测定方法

每日测量高位池水温3次；使用高精度数显电子盐度计，定期监测盐度；使用广泛pH试纸检测pH值；用水质检测试剂盒定期测定亚硝酸盐氮、氨氮含量，溶氧仪检测水体中溶解氧（DO）含量。

1.4.3 水样采集时间

水质指标测定时间为每隔5 d于10：30取样测定，12口池中每口取样至少3次，取其平均值用于统计。每天06：30、12：30、18：30各测量水温1次，取平均值进行统计。

1.4.4 肝脏压片观察

试验过程中，发现A组中的一口高位池虾苗肝萎缩比较严重。随机抽取5尾肝萎缩比较严重的幼虾以及其他组正常健康的幼虾，用解剖器取出肝脏，放入装有生理盐水的载玻片，盖上盖玻片进行压片处理，显微镜镜检观察。

1.4.5 不同组别的生物学特征测量

养殖期结束后，取A、B、C、D 4组虾苗，每口池取30尾，测定虾苗体长、体质量，计算质量增加率和特定生长率。采用SPSS 15.0单因素方差分析对数据进行统计，结果用（平均值±标准差）表示。

质量增加率（%）=100%×（末均质量-初均质量）/初均质量；

体质量特定生长率（%·d）=100%×（ln末均质量-ln初均质量）/饲养天数；

体长增长率（%）=100%×（末均体长-初均体长）/初体长；

体长特定生长率（%·d）=100%×（ln末均体长-ln初均体长）/饲养天数。

1.5 数据分析与统计

试验数据采用SPSS 19.0软件中ANOVA单因素方差分析，进行各组间数据两两比较，对其差异进行分析。

2 结果与分析

2.1 水质理化因子测定

4组高位池的水温见表1。由表1可见，4组高位池的水温变化为21.3～26.8℃，各组间水温差异较小。4组高位池的盐度为0.420%～0.470%，说明水体的盐度比较稳定，满足对虾生长需求（表2）。DO是水产养殖动物重要的水质影响因子，4组高位池的DO为6.12～7.60 mg/L，满足对虾生长需求（表3）。4组高位池在加入乳酸菌之后，养殖水体pH值变化范围不断变小，D组的数值最稳定，为7.55～7.75（表4）。乳酸菌对降解水体中的亚硝酸盐氮具有明显效果，在4月3日开始，C与A组相比，差异显著（P＜0.05），D组A组相比，差异极显著（P<0.01）；在4月18日之后，C组和D组的测量值已趋于稳定（表5）。

表1 4组高位池的水温 ℃

表2 4组高位池的盐度 %

表3 4组高位池的DO mg/L

表4 试验期间四组高位池的pH值

表5 4组高位池的亚硝酸盐氮① mg/L

4组高位池中氨氮一直处于较低水平，在3月24日—4月13日，氨氮数值有所增加，C组和D组的增加幅度明显较小；A组在4月8日达到峰值，B组在4月13日达到峰值，之后开始下降，2组间的数值比较接近。在4月18日时C组值已明显下降，D组值为0，到4月23日时C和D组的检测数据均为0（表6）。

表6 4组高位池的氨氮 mg/L

2.2 不同试验组生长速率统计

乳酸菌对南美白对虾生长性能的影响见表7。由表7可见，随着乳酸菌剂量的增加，在饲养30 d后，C组末体长、末体质量比A组均有显著提高（P＜0.05），而D组末体长、末体质量则比A组均有极显著提高（P＜0.01）。说明乳酸菌在促进其生长性

表7 乳酸菌对南美白对虾生长性能的影响①（n=30）

2.3 肝脏压片显微观察结果

能方面效果显著。

患病、正常虾苗肝脏压片结果见图1（a）（b）。由图1可见，正常虾苗和发病虾苗两者都寄生有大量弧菌，发病虾苗肝脏压片显微镜观察附有更多异物，且有明显萎缩现象；而正常虾苗的肝脏压片干净、无异物，且肝脏组织纹理清楚。

图1 患病、正常虾苗肝脏压片结果

3 讨论

乳酸菌是一类无芽孢、革兰阳性菌的总称，可在机体肠道内产生维生素和促生长因子，从而实现促进对虾生长的目的。张家国等研究发现，乳酸菌在水产动物的养殖方面具有改善水质、提高机体免疫能力和替代抗生素药物治疗疾病等功效。文献[16]研究表明，从皮皮虾、南美白对虾肠道及养殖池底质活性污泥中，分离具有水质净化功能的乳酸菌，可有效降低水中亚硝酸盐氮和氨氮，具有显著的水体净化效果。本研究中，拌喂乳酸菌饲料的试验组与对照组相比，水温、盐度、pH值、DO值均无显著性差异，但添加较多剂量乳酸菌的D组，水体中溶解氧含量更高，水体pH值更稳定，氨氮和亚硝酸盐氮测定值更低，说明随着养殖时间延长，乳酸菌在改良水质方面的功能逐渐显现出来，与黄浦江等的研究结果一致。

文献[18]研究显示，南美白对虾养殖饲料中添加乳酸菌，可显著增加机体肠道有益菌数量、抑制病原菌的生长繁殖、提高机体病原菌的抵抗力。本研究显示，随着乳酸菌添加剂量增加，对虾虾苗体长和体质量的增加幅度亦提高，并显著高于对照组；同时，肝脏的显微压片结果显示，乳酸菌可有效提高对虾机体抗病能力，减少有害物质引起的虾苗肝萎缩。Kongnum等研究发现，南美白对虾饲料中拌喂乳酸菌可显著提高质量增加率、特定生长率、免疫力、成活率及抗弧菌效果。张玲研究表明，日本囊对虾和中国明对虾的养殖过程中口服或浸浴乳酸菌，均能改善水质、提高成活率和抗病能力。文金顺研究表明，提高南美白对虾养殖环境中的乳酸菌含量可显著提高虾体生长速度。汪海燕等研究表明，南美白对虾发酵饲料中添加乳酸菌可显著提高对虾生长速度，体长比对照组增长0.5~0.8 cm。Sha等研究表明，乳酸菌不仅可以促进对虾生长，还可提高对虾的免疫应激和抗病能力，成活率显著提高。郑玉等在南美白对虾饵料中添加虾体质量3%的乳酸菌，饲喂8周后，对虾的终全长、质量增加率和特定生长率均具有显著提高。

4 结论

本研究结果显示，南美白对虾虾苗淡水养殖过程中，投喂添加了1.25%乳酸菌的饲料后，与对照组相比，试验组虾苗生长速率更快，活力更强，水体环境更好，水体pH值更稳定，溶解氧含量更高，肝萎缩现象更少，说明饲料中拌喂乳酸菌可以促进南美白对虾虾苗生长。