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鱼类麻醉保活运输研究进展

发表时间:2024/11/24 07:59:08  来源:河北渔业 2024年6期  作者:董秀金 徐一力 吴冰 许建和  浏览次数:391  
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在活鱼运输过程中由于捕捞、运输时间、运输量等应激胁迫,极易造成鱼体受伤甚至死亡,导致经济损失。如何采取适当措施,降低活鱼运输应激反应,改善动物福利,提高运输成活率目前已受到越来越多的关注。本文介绍了麻醉保活技术在活鱼运输中的应用和最新研究进展,包括麻醉剂的种类,麻醉保活的影响因素以及麻醉保活对鱼体的影响等,为活鱼运输从业者和科研人员提供参考和借鉴。

1 麻醉剂种类

麻醉保活运输法的原理是通过麻醉药物干预鱼类的神经系统,使其在运输过程中处于相对镇定的状态,降低因环境变化引起的应激反应,从而能够在运输过程中减少对鱼类的伤害。目前常见的渔用麻醉剂有MS-222、丁香油(酚)、CO2、2-苯氧乙醇等[1]。

1.1 MS-222

MS-222(间氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸盐,Tricaine methanesulfonate),又名鱼安定或鱼静安[2],是一种问世于1920年的老牌麻醉药物。MS-222具有使用浓度低、麻醉复苏快、毒副作用小等优点,因此在国内外水产行业得到广泛应用,也是目前唯一被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于食用鱼的麻醉剂[3]。MS-222最初被用作人类局部麻醉的替代品,后来发现其对冷血动物的麻醉效果也很明显,因此在水产行业中得到了广泛应用。自上世纪七十年代末,我国研究人员就尝试将MS-222应用于养殖鱼类的苗种运输,并进行了大量相关研究。肖贵榜等[4]研究了不同浓度MS-222对红尾副鳅(Paracobitis variegatus)麻醉的影响,结果显示MS-222的最适麻醉浓度为110~180 mg/L,其用于长途运输最适浓度为45~85 mg/L。RAIRAT等[5]在MS-222对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的麻醉试验中,发现最佳麻醉剂量为300 mg/L。

1.2 丁香油

丁香油是丁香树的花朵干燥蒸馏而得,自带丁香花芳香气味,是一种浅黄色或无色的油质液体,具有杀菌、抗病毒、镇痛、麻醉等药理活性,其主要有效成分丁香酚约占油质85~95%[6]。作为一种纯天然麻醉剂,丁香酚兼具安全、高效和价格低廉的优势,因而被大量研究者关注。陈欣怡等[7]发现,褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)浸浴在40~50 mg/L丁香酚麻醉溶液内15 min全部进入深度麻醉状态而无一例死亡,且可实现全部复苏;张建明等[8]研究丁香酚对长薄鳅(Leptobotia elongata)幼鱼的麻醉时发现,在20 mg/L丁香酚麻醉剂内浸泡10 h,长薄鳅幼鱼存活率100%;王彩霞等[9]研究加州鲈(Micropterus salmoides)无水保活运输发现,在30 mg/L的丁香酚麻醉浓度下,15 ℃无水保活10~13 h后,存活率达100%。无水运输后鱼肉品质稍有变化,但48 h后即可恢复正常。Liu等[10]在丁香酚对黄颡鱼(Pseudobagrus fulvidraco)生理生化和基因表达影响的试验中,以25~30 mg/L的丁香酚浓度模拟运输黄颡鱼12 h,结果发现,丁香酚可显著降低鱼体新陈代谢,减少其应激反应,保护肝脏健康,提高机体免疫力。然而,对于丁香酚的安全性,世界各国各组织持有不同态度。欧盟食品安全局(EFSA)研究发现丁香酚会对皮肤和眼睛产生刺激,严重的会导致过敏[11]。美国国家毒理学组织(NTP)研究认为丁香酚对小白鼠肝癌有潜在风险[12],美联邦政府暂不允许其用于水产品麻醉,但允许其作为食品添加剂在食品中直接添加。澳大利亚、芬兰、新西兰等国则认为丁香油/酚可以短时间内代谢,明确其可以作为水产麻醉剂[13-14],推荐用量10~100 mg/L。我国最新的GB 1886.129-2022《食品安全国家标准》明确规定丁香酚可以作为食品添加剂[15]。

1.3 CO2

CO2在自然界中无处不在,也是动物体内新陈代谢的副产品。因此,利用CO2作为渔用麻醉剂对人体无害。值得一提的是,CO2麻醉没有药物消退期,运输完成后可直接进入市场销售。它是唯一获得FDA明确表示不反对使用的麻醉剂[16]。因此,CO2麻醉运输在水产领域具有巨大的应用潜力,经济价值和科研价值显著。目前,国内外科研人员已将CO2麻醉应用于大口黑鲈(Micropterus salmoides)[17]、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)[18]、卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)[19]、珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)[20]等。但CO2麻醉鱼类时,入麻和复苏时间都比较长,且对不同种类的鱼麻醉效果差别较大,麻醉后水环境的pH需及时调节,CO2麻醉剂量范围较小,在一定程度上限制了其应用。

1.4 2-苯氧乙醇

2-苯氧乙醇为无色微黏液体,可溶于水。2-苯氧乙醇作为渔用麻醉剂的优势在于可显著降低鱼类运输中的排氨率[21],但其综合应用价值不如 MS-222 和丁香油,因而应用较少。研究发现,不同体积分数的2-苯氧乙醇和丁香油在一定温度下对鱼的麻醉效果有所不同。韩军军等[22]研究发现,在水温11~12.1 ℃,pH 7.07~7.53的条件下,2-苯氧乙醇对质量为10 g左右的扁吻鱼(Aspiorhynchus laticeps)的最适麻醉浓度为800~1 000 μL/L,麻醉浓度越高,麻醉时间越短;Yildiz等[23]探究了2-苯氧乙醇对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)的麻醉效果,结果表明,随2-苯氧乙醇浓度的增加,虹鳟的复苏时间显著增加。尽管2-苯氧乙醇具有低价格、使用方便、灵敏度高等特点,但考虑到2-苯氧乙醇在食用鱼麻醉方面存在潜在风险,研究者尚不建议将其用于食用鱼麻醉[24],2-苯氧乙醇在渔用麻醉领域的应用仍需进一步评估。

1.5 其它麻醉剂

除上述几种常用麻醉剂以外,其它活鱼麻醉剂也偶有报道。Jiang等[25]报道了香草醛对鲫鱼(Carassius auratus)麻醉效果的影响,高浓度香草醛可显著缩短鲫鱼深度麻醉时间,且对鲫鱼生理指标和组织结构影响较小,但麻醉后苏醒时间较长。Cosmo等[26]发现氯化镁辅助异氟烷可以快速有效地麻醉章鱼(Octopus vulgaris),将1%的异氟醚注入仍含有氯化镁的生理盐水中,5 min即可实现完全麻醉。10~15 min范围内可完全恢复。但该麻醉剂主要用于海水运输,其在淡水运输中的作用尚未尝试。

2 麻醉保活运输的影响因素

影响麻醉运输效果的因素主要包括麻醉剂种类、鱼体规格、运输水温、运输密度等。

王文豪等[27]在研究丁香酚对大口黑鲈幼鱼保活运输的试验中发现,在水温27.5~28.5 ℃时,体质量为120~140 g的幼鱼最佳保活运输浓度为10 mg/L;李宁等[28]在研究丁香酚对大口黑鲈保活运输的试验中发现,当水温(16.5±1.5) ℃时,体质量为310.4~410.4 g的大口黑鲈最佳保活运输浓度为18~20 mg/L。胡望娇等[29]研究了MS-222和丁香酚对松江鲈的麻醉效果,结果表明,松江鲈幼鱼的MS-222最适麻醉浓度为60 mg/L,丁香酚的有效麻醉浓度为20~80 mg/L。另有研究发现,亚东鲑(Salmon trutta)鱼种的MS-222有效麻醉浓度为100~160 mg/L,丁香酚有效浓度为50~110 mg/L[30]。由此可见,不同麻醉剂种类对同一鱼种不同规格的有效麻醉浓度不尽相同,同一麻醉剂对不同鱼种的有效麻醉浓度差别较大。

另有研究表明,在低温条件下,鱼类的存活时间较长。范秀萍[31]研究发现,珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)低温休眠温度为12~13.5 ℃,在此温度下,机体代谢低,应激处于较低水平,免疫应答处于较高水平。丁亚涛[32]研究发现,鳊鱼(Parabramis pekinensis)低温保活临界生存温度为2 ℃,麻醉保活最适温度为7 ℃。张伟佳[33]在综合评价温度对生理及生化指标的影响后认为,在20 h以内的有水运输时长,大黄鱼(Larimichthys crocea)的最佳麻醉温度为16 ℃;而当运输时长为24~48 h时,最佳麻醉温度为13 ℃。鱼类生活在水中,鱼体温通常随外界水温变化而变化,由此影响体内新陈代谢效率。温度同时会影响水中的溶氧含量高低,其很大程度上决定了鱼类存活。当水中溶氧低时,鱼类会因长时间缺氧导致死亡,因此提高水中溶氧量是一种既简单有效又经济的提高存活率的方法,主要原因在于运输时鱼类会受到温度、水质、振动、拥挤等变化产生应激,鱼体需要消耗更多氧气参与应对应激反应,以维持鱼体的正常生命活动。

高密度运输可有效提高运输效率,然而在一定的溶氧条件和水体积限制下,鱼类的运输密度越高,水体中积累的代谢废物和氨氮含量越高,溶氧量也随之降低。此外,高密度运输环境中,鱼体会由于挤压碰撞甚至互相攻击而产生较强应激,导致血液皮质醇(Cortisol,COR)含量迅速升高[34]。研究发现,长时间拥挤胁迫对大菱鲆(Scophthalmus maximus)血液生化指标和应激相关基因表达均可产生不利影响[35]。因此,在追求高密度运输的同时,也应综合考虑运输时长、温度、鱼种等影响因素,权衡运输密度与鱼体死亡损失的利弊关系,实现运输效益最大化。

3 麻醉保活运输对鱼体生理生化的影响

血液是一种重要的结缔组织,承担了物质运输、物质交换、生理调节及能量供应等功能[36],对于鱼类的存活及各项生理功能的发挥至关重要。血液经心室泵出,流动到鱼鳃,血红蛋白携带上氧气,然后流经各个器官,把携带的营养和氧气交换出去,代谢废物经静脉再汇集到心房,再进入心室完成新一轮的循环。在此过程中,血液生化指标可以直接反应鱼类健康、营养供给和应激等方面的变化[37]。常用的检测指标为天门冬氨酸转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、皮质醇、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、乳酸等[38]。

3.1 AST

AST是一种重要酶,其作用是将糖、脂质、蛋白质代谢关联起来。当肝脏受损时,血液中AST迅速升高。白婵等[39]在研究丁香酚麻醉斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)无水保活运输试验中发现,6 ℃时,60 mg/L丁香酚麻醉10 min后无水保活5 h,斑点叉尾鮰AST活性显著升高,增加值为44.91 U/L。唐忠林等[40]研究丁香酚对“优鲈3号”模拟运输麻醉时发现,6 mg/L丁香酚麻醉模拟运输10 h,在最初2~6 h,麻醉组AST活性显著高于对照组,试验结束时,麻醉组和模拟组的AST活性均明显升高。然而就整个试验过程而言,两者升高过程并不一致。初始麻醉组的高AST活性被认为是麻醉剂本身可作为应激源所致。

3.2 皮质醇

皮质醇被誉为“鱼类应激第一信使”,由于测试灵敏度高,是最常见的应激强度测定指标[41]。当鱼体受到刺激后,下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴心开始发挥作用。在这一过程中,下丘脑分泌的促肾上腺皮质激素释放激素量会明显增加。随后,这种激素会进一步引发垂体分泌的促肾上腺皮质激素量大幅上升。这一连串的应激反应最终促使了皮质醇的分泌量增加,因此皮质醇在鱼体应激反应中发挥重要作用。大黄鱼的麻醉保活研究结果表明[42],大黄鱼经过MS-222麻醉模拟运输12 h后,麻醉组的皮质醇浓度显著低于对照组。曹杰等[43]研究大菱鲆麻醉保活运输时发现,水温8 ℃时,浓度为40 mg/L的MS-222麻醉12 h,麻醉组的皮质醇变化浓度显著低于对照组。由此可见,麻醉剂可显著降低长时间保活运输中鱼体的应激反应。

3.3 尿素氮

尿素氮是鱼类蛋白质代谢过程中产生的一种含氮废物,主要由肝脏合成,并通过肾脏排出体外,常被用作评估肾脏损伤的重要指标[44]。王肇鼎等[17]通过研究CO2麻醉大口黑鲈的模拟运输时发现,CO2处理组与对照组的尿素氮浓度均显著变化,但处理组尿素氮浓度始终低于对照组;李泊岩等[45]在研究丁香油对俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)的麻醉效果时发现,鱼体麻醉后的尿素氮含量显著低于对照组,与CO2麻醉大口黑鲈的试验结果基本一致。分析原因可能是鱼体经过麻醉后,肾功能受到了一定损伤,同时麻醉也减轻了鱼体的新陈代谢和应激反应。

4 麻醉保活运输对组织结构的影响

大量研究证实,麻醉可以有效降低鱼体应激,有助于延长保活时间和保活成活率。但麻醉剂对于鱼体来说,本身也是一种应激源,因而近年来,研究学者开始关注麻醉剂对鱼体组织结构的影响,从另外的角度观察麻醉剂对鱼体的影响。谢希尧等[46]研究MS-222和丁香酚对四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)幼鱼的静水麻醉试验时发现,随着两种麻醉剂浓度的升高,可以观察到四指马鲅幼鱼的肝脏组织受到损害。分析原因可能在于,随着两种麻醉剂浓度的提高,它们作为应激源对幼鱼产生了额外的应激,这种应激超出了幼鱼肝细胞的自稳调节能力,导致部分肝细胞核出现萎缩甚至消失等异常现象。此外研究者观察到幼鱼鳃组织也受到了显著影响,麻醉剂导致了鳃组织微观结构的破坏,并引发了鳃形态的改变。章霞等[47]在研究MS-222对大黄鱼的麻醉效果中发现,大黄鱼经40 mg/L浓度麻醉24 h,会造成肝细胞肿胀,次级鳃丝上皮细胞坏死。麻醉剂对鱼体组织结构造成损伤但不致死,结论与谢希尧等[46]的报道基本一致。由此可见,长时间过高浓度的麻醉会对鱼体组织结构造成一定的损伤,严重的可能导致机体功能丧失,麻醉复苏后鱼体损伤能否修复还需要进一步研究。

5 结论与展望

我国是水产养殖大国,也是水产养殖消费大国,对于活鱼运输有着巨大的需求。如何能够低成本、高效率、高成活率的运输,尽可能提高经济效益,是水产行业相关人员坚持不懈的追求目标。麻醉剂在鱼类保活运输中发挥一定的作用,但仍存在成本较高、作用机理不清晰及使用残留等问题。随着科技的进步,研究的持续深入和法律法规的不断完善,将有望开发出更高效、残留更低的渔用麻醉剂,从而提高运输过程中的成活率,减少运输风险和损失,为消费者提供健康安全的新鲜水产品。

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