了解鱼类血液淋巴细胞

随着鱼类免疫研究的深入，充分研究鱼类的各种免疫细胞的组成，鱼类相关细胞的分选变得尤为重要，而认识鱼类血液中相关细胞的特征则应是我们开展这一研究的基础，小编梳理相关知识资料，带你了解一下鱼类的血液及血淋巴细胞特征相关知识，旨在提高大家对鱼类血细胞认知，为流式分析分选、鱼类生理研究等奠定基础。

鱼类的血液是一种特殊的循环组织，由悬浮在液体细胞间物质(血浆)中的细胞组成。硬骨鱼的血容量很小，只有体重的5%。鱼类的血细胞主要有红血球(红细胞)、白细胞(白细胞)和血小板（凝血细胞/血栓细胞）。

图1. 鱼类血液组成

一、鱼类血液中的细胞成分

1.红细胞（Erythrocytes, Red Blood Cell, RBC）

与其他非哺乳脊椎动物一样，鱼类红细胞呈卵圆形，细胞核位于中心位置。细胞质中血红蛋白饱和。红细胞的数量跟鱼的种类、年龄、季节和环境条件相关联。一般鱼类红细胞数值范围为1.05-3.0×106/mm3。值得注意的是，在一些南极南极鱼类中，血红蛋白可以大大减少或完全消失，并且没有红细胞。

图2鱼类红细胞

(A, B)红细胞(RBC)呈卵圆形，均含有中央核，A为HE染色，B为TB染色。

(C)红细胞(黑色箭头)PAS染色阳性，（D）红细胞Gomori硝酸铅法显示酸性磷酸酶活性。

2.白细胞（Leukocyte, White Blood Cell, WBC）

与高等脊椎动物的白细胞一样，鱼类外周血中的白细胞也分为无粒白细胞（Agranulocytes）和有粒白细胞（Granulocytes）。无粒白细胞无颗粒(溶酶体)存在于细胞质中，它们的细胞核是不裂的。无粒白细胞2种:淋巴细胞和单核细胞。有粒白细胞有3种：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。

图3. 鱼类白细胞分类及其形态特征

（1）淋巴细胞（Lymphocytes）

淋巴细胞是白细胞中数量最多的类型，占白细胞总数的70 - 90%。硬骨鱼类淋巴细胞的平均直径在5 ~ 8 μm之间(大淋巴细胞可达12 μm)。细胞核几乎占据了整个细胞，只留下少量的嗜碱性细胞质边缘。它含有一些线粒体和核糖体。

图4. 人淋巴细胞形态特征及分类（供参考学习）

（2）单核细胞（Monocytes）

单核细胞数量不多，占白细胞总数的0.1-0.5%，所以也有一些学者否认硬骨鱼中存在单核细胞。它们在组织化学上类似于哺乳动物单核细胞，具有少量细小分散的颗粒，被周期酸-希夫(PAS)和酸性磷酸酶阳性染色。细胞质被注入伪足。偏心核的染色质边缘分散。溶酶体的电子密度很高。高尔基体发育良好。在适当的环境下，它们发展成为单核吞噬细胞系统(巨噬细胞)的成熟细胞。

图5. 人单核细胞形态特征（供参考学习）

（3）中性粒细胞（Neutrophils）

在有粒白细胞中，中性粒细胞最为丰富。鱼类相关报道表明血液循环的中性粒细胞数量变化很大，占白细胞的1-25%。硬骨的中性粒细胞有浅灰色的颗粒状细胞质(Romanowsky染色)。在血涂片中，中性粒细胞呈圆形或椭圆形，通常比红细胞大。偏心核的形状通常与人肾相似，但在成熟细胞中可以辨认出两个或三个核叶。中性粒细胞呈过氧化物和苏丹黑阳性反应。

图6. 人中性粒细胞形态特征（供参考学习）

（4）嗜酸性粒细胞（Eosinophils）

硬骨鱼血液中嗜酸性粒细胞的报道多种多样。在不同种类的鲑鱼(Salmo, Oncorhynchus)的血液中都发现了它们，但据报道在虹鳟血液中很少发现或不存在。目前的研究也一致认为嗜酸性粒细胞存在于鲤科鱼类血液中。中性粒细胞中通常存在大的胞浆颗粒，而可以被Romanowsky或oreosin（伊红）染成鲜红色来鉴别。

图7. 人嗜酸性粒细胞形态特征（供参考学习）

（5）嗜碱性粒细胞（Basophils）

如同嗜酸性粒细胞一样，关于鱼类血液中是否存在嗜碱性粒细胞的报道也各不相同。在金鱼，鲑鱼，鲤鱼中，部分报道Romanowsky染色的嗜碱性粒细胞具有一个大的偏心核，有均匀的染色质和大的紫蓝色的细胞质内含物。此外鱼类肥大细胞与哺乳动物相似(结缔组织栖息地和异色胞浆颗粒)。

图8. 人嗜碱性粒细胞形态特征（供参考学习）

3.凝血细胞（Thrombocytes）

鱼类血细胞组成最大的特点在于不含有和哺乳动物血细胞一样的血小板，而是含有类似功能的凝血细胞（也有称血栓细胞），哺乳动物血小板是由骨髓巨核细胞分离出来的细胞质小块。鱼类凝血细胞主要呈梭形，细胞核与细胞形状一致。Romanowsky染色发现凝血细胞细胞质呈透明质。凝血细胞与其他白细胞明显不同的是，其细胞质中具有泡状和微管状结构，还具有糖原颗粒。姬姆萨染色后，富含染色质的细胞核呈深蓝色或深紫色。细胞质极为稀少，在纺锤形核的一个极附近通常有浅蓝色区域。除了参与血液凝血，也有报道称，鱼类的血小板是血液巨噬细胞，形成一种对外来物质的保护屏障，被认为可能是真正的消化细胞，因为它们可以通过吞噬直接清除血液循环中的细胞碎片。此外，鱼类的血小板在功能上与高等脊椎动物的血小板是同源的。凝血细胞含量为60000-70000/mm3。

(来源： 水生动物健康评估)

参考文献

【1】《The Physiology of fish, fourth Edition》，Edited by David H. Evans et al.

【2】陈晓耘. 鱼类的血液[J]. 重庆师专学报, 2000(3):70-73.