菌种现场“活化”和“扩培”误区

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随着“限抗禁抗”等政策的实行、绿色养殖理念深入人心，微生态制剂在水产养殖中的应用越来越多，也越来越受到养殖户的认可。水产微生态制剂种类多样，具体作用和使用方法也有所不同，而市场产品良莠不齐，许多养殖户在使用过程中存在一些误区。

1、芽孢菌必须活化且长时间活化？

芽孢杆菌是能形成芽孢（内生孢子）的杆菌或球菌，从中可以看出它有菌体和芽孢两种形态。芽孢实际上是其应对外界不良环境而形成的休眠体，它具有厚而含水量低的多层结构，对热、干燥、辐射、化学消毒剂和其他理化因素有较强的抵抗力，所以存放时间较长，市场的芽孢杆菌产品一般以此类形态存在。但芽孢杆菌要发挥作用就必须从休眠状态中“醒过来”，即从芽孢变为营养体，这个过程就是“活化”。

如果把芽孢比作植物的种子，那么营养体就是植物的幼苗，种子发芽需要营养和水分等条件刺激，芽孢杆菌活化也同样如此。那么芽孢杆菌现场使用一定要活化吗？我认为活化不活化都可以，芽孢变成营养体需要一定的温度、水分、氧气和营养，这些条件养殖水体都具备，只是不完全适宜而需要更长的时间而已。一线养殖户为了缩短萌发时间而选择活化也无可厚非，但活化芽孢时只用红糖水浸泡，既不充氧也不把握时间却完全不可取，最初有一定氧气下的条件下，可能有部分芽孢被激活变成营养体，但氧气耗光之后随时间延长剩余芽孢不会萌发，已萌发的营养体又会大量死亡，反而降低了使用效果。另一方面，就算充氧，长时间活化也会面临营养耗尽营养体死亡的现象，故如果一定要活化的话，时间建议2-4小时，既能起到刺激活化的作用也不会起到反效果。

2、芽孢菌只能在晴天使用？

芽孢杆菌因为耗氧故无法在溶氧较低的阴雨天气使用似乎是行业共识，但芽孢杆菌耗氧真的像我们想象的那么严重吗？答案是否定的。下图所示列出了1×109CFU/L芽孢杆菌在5天时间内的耗氧量，耗氧最高的一株芽孢菌5天时间内仅消耗7mg的氧气，而在池塘实际养殖中，含量为100-200亿/g芽孢杆菌正常用量为100-200g/亩•米，可以计算出每升水体菌量为3×106CFU，是实验中用量千分之一，由此可以看出加入池塘芽孢杆菌的耗氧量可以忽略不计。另一方面，芽孢杆菌在耗氧的同时也在分解大量的原本也需要消耗氧气的有机质，这样一增一减，耗氧并没有我们想象中的那么可怕。我们看到的耗氧主要是池塘有机质过多造成的，如果池塘本身有机质未超负荷、正常运转且溶氧超过5mg/L，那么无论晴天还是下雨，我认为都可以使用芽孢杆菌。

3、乳酸菌扩培仅用红糖就行？

可以但并非最优选择。我们知道细菌生长繁殖所需的营养物质包括水、碳源、氮源、无机盐和生长因子，而红糖主要提供碳源，其含氮量极低，根本无法满足乳酸菌大量繁殖所需。实际实验中我们也选取了市场上口碑比较好的几家乳酸菌发酵菌剂，在只采用红糖扩培时，2天pH均可降到4.0以下，但计数菌量最多不超过3亿CFU/mL。故越来越多的动保公司开发出定向扩培培养基，在使用专用的发酵剂扩培时，实测菌量可达到7亿CFU/mL左右，是仅用红糖的2倍多。

4、乳酸菌扩培产气越多效果越好？

不尽然。乳酸菌按发酵类型可以分为三大类，分别为同型乳酸发酵、异型乳酸发酵和兼性异型乳酸发酵。同型乳酸发酵指的是葡萄糖经过糖酵解途径(EMP)发酵，只生成乳酸这一种代谢产物，异型乳酸发酵指除生成乳酸外还生成CO2和乙醇或乙酸等物质的发酵途径。市面上现场扩培乳酸菌产品基本上主要由粪肠球菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌和嗜酸乳杆菌等1种或几种构成，而这几种乳酸菌均为同型乳酸发酵，是不会产气的，所以仅以产气大小判断乳酸菌发酵水平是不对的。实际乳酸菌扩培产品一般会包含少量酵母菌，它可在发酵初期消耗氧气造成厌氧环境协同乳酸菌增殖，但超过一定含量（实验数据约5.0×106 CFU/g）后随着酵母添加量的增加发酵后乳酸菌菌量反而降低，表现出酵母发酵大量产气的特点，当然现场乳酸菌扩培大量产气也有可能是感染产气的杂菌导致，所以养殖工作者在有条件的情况下一定要做好扩培前的消毒处理。

(作者：刘宝同)

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